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第204章 医学泰斗(第1页)

孙长明就像个路过的NPC,丢下几句毫无杀伤力的台词後就自己退场了。

关於无能的丈夫这一块————

陈浩还要说:「好像看见孙教授关门的时候捂着胸口,不会有事吧?」

易向晚:「没事,应当是受了点内伤,回去休养几天就好了,咱们继续工作吧。

7

陈浩和易向晚,人走了还要补刀!

而且刚才正是陈浩一脸无辜地提出字字诛心的问题。

这个陈浩,怎麽这麽坏啊!

重新开始实验。

NanoDrop上几组数据都很完美。

王晓晴乖巧请教:「江河,接下来怎麽做?」

目前浓度和纯度虽然达标了,但miRNA片段太短。

传统的逆转录实验,一般都是用oligo(dT)引物去抓mRNA尾巴上的Poly—A结构。

可是miRNA根本没有这种长尾巴,常规的逆转录引物根本抓不住它。

这在08年又是一个技术难题。

全世界的实验室都在寻找一种高效特异的办法,把这短短二十几个硷基的片段给稳定地逆转录出来。

江河道:「之前讲过茎环引物,当然,後入组的组员来得晚不知道,陈浩,你给大家简单讲讲。」

「ok啊。」

陈浩道:「这个引物分为两部分,後面是一个能够自我互补打折形成的茎环结构,它的作用是提供空间位阻,增加稳定性;前面伸出来一小段,大概6到8个硷基,这段序列和我们要抓的特异性miRNA的3端完全互补。」

王晓晴点点头:「明白了,引物前端这几个硷基先跟miRNA的尾巴精准结合,然後逆转录酶就可以用这个双链结构作为起始点,一路把miRNA的互补链给合成出来。」

杨煦很想插嘴装逼。

可这一段江河还没教他。

他也不会啊。

只能悻悻放弃。

陈浩则感觉很爽。

—没想到吧!自己也有给教授上课的一天!

他笑了笑,接着说:「不仅如此,茎环结构在室温下是摺叠闭合的,只有在结合了目标miRNA後才会打开,这会极大降低引物结合到其他杂质RNA上的概率,特异性会呈指数级上升。」

陆晓林补充:「对了,引物序列老大已经设计好了,今天早上刚送到。」

他拉开旁边的一个抽屉,拿出一排装在冰盒里的离心管。

江河看了眼,点点头道:「现在配置逆转录体系,16度30分钟让引物结合,42度30分钟逆转录,最後85度5分钟灭活酶。」

「收到!」

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